?????Caitlin Smith / ?? ??? / ?? ????? ???????2020-6-7 21:28:20

??????????????

  CRISPR/Cas9????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????紦???????????????????????????????????????????????????????????????????о??????????????????????????????????????????????????????????????

  ??????????????????????????CRISPR?????????????????????????????????У????????????????????????Jamie Cate????????:“CRISPR?????????????????????????????RNA??DNA????????????????????????????????????????????????”

  ?????????????????????????CRISPR???????????????÷?Χ??????????????????Ч?????????????磬????????????????????????????????????????????????滯????????и??????????????????????????????????????????κ????????????????????????????????????????????α??????????????????????????????

 

????DNA??RNA??????

 

  ????CRISPR/Cas9????????????????????????????????????????????? ??PAM?????????λ??????λ??????Ρ?PAM??????Cas9????????????????????????????????????????????????????λ??????β?????PAM???У????????????????????????????????—?????УCarl R. Woese????????????о?????????????о??鸺???????????????????????CRISPR????????????????????????????????????PAM???н??б????????????????

  ??????????????????????PfAgo??????????????????ARE??????????PfAgo??????????????????????????????????Argonaute???????????????????II????????????????????????????λ?????и?DNA?? “???????”(1)??

  “?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????PfAgo???????????????DNA???е???DNA????”????????“??????????·????????????????????????????DNA??????λ???λ??”

  ?????DNA??PfAgo???????и??????????????и????κε??????????????PfAgo????????У??????16?????????????????????????????????4??8????????????;??????????????????????????и?λ????????????????????????????PfAgo???и?DNA?????????????????????????????????????DNA????????????

  ???????????????????????????????:“?????????????????PfAgo/ARE???????????????????????????????????????????????????????????Щ?????п?????????????????????”?????????Modular Bioscience????????PfAgo????????е?????????????????????????????????????

  ???????CRISPR????Argonaute????????Marinitoga piezophila ??MpAgo?????????Cate???????о???????????????о??????????????????(2)??“?????????????????RNA????????????????????????????????е?RNA???????” Cate??????????????RNA???????????????λRNA??????ù???????RNA???????????

  Cate??????????????????о??Audrey Lapinaite???????????????“??ν???RNA?????????MpAgo”??Cate??????????????????????????????RNA-?????????RNPs????????????????????RNPs??Lapinaite?????????RNA??5’-????????????κ???????????????RNPs???????????????RNA?б???к???????????????????ε?RNPs???н??????????????????????????????????RNA????

  Cate?????MpAgo RNPs????RNA??????е????????:“?????????????MpAgo??????????ж?λRNA????????????????????????????????RNA???????”???MpAgo???????????????????????????????????????Cate???????????????????????????????Argonautes????ι??????

 

???????

 

  ????CRISPR/Cas9????????????????о??????????????????????????????????????????????????????????????????Yu-Hsuan Tsai?????????Anthony Perry??????????????????????????????CRISPR????(3)??????????????е????,?????????????????й?????????????????????????????????????????????????????“????????????????????????????????????????Щ????”Tsai???

  Tsai??Perry???о?С???????????????????????????????????????С?????????С?????????????У??о????????????????????????????ù??????Cas9????????????????????????????????????????Lys??Boc???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

  ?о??????????Lys??Boc?????????????????????????Lys???????з????????????Tsai??Perry??????????????????????????????????????:“??????????????????Cas9?????????????????????????????????????????????????????????????”Tsai???

  ????????????ó????δ???????????????????????е???????????Щ????仯????Щ?仯???????????????????????磬??????У???????Ч??????????????????????????????????????????????????CRISPR???????????“????????????????????λ??????????????????????????????????????????”??Tsai???

  ??????????????????????????????????????????????????????????????????????NCCR???????о???????????????? Tom Ward???????????????????????????????????????????????????????????о??????????????????Э???????Ward??????????????????????л???????Stefan Matile???????????????????????????????????????Martin Fussenegger?????????????????????????????????????????????????????????????????黯?????????

  ??????????????????????????????????????????????????????????Ward???“?????????????????”?????????????????????????????????????????????????????????????????——???????????????????Ward?:“???????????????????????????????????”

  ???ε??????????????????????????(4)????????????????????????????????????????????????á????磬????????????????????????λ??????“?????????????????????????” Ward?: “??????????????????????????????????????????????????е??????????????????????????????????”

 

???????????

 

  ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????鶯????й??????????CHO?????????????CHO??????????——??????????????????????——??????????????????????????????侺??????????????????????????????????档

  ???磬AbSci?????SoluPro???????????????????ζ????????????????????????????????????????4g/L???????????20g/L????????????????????Щ???????????????б?????????鶯????????????????????AbSci????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

  ?????????????????????????????????????????????????????“????????????????????????γ???????????????????????????????????????????????????????????????????????С???????????????????????????????????????????????????”AbSci????????????й?Sean McClain??????????????SoluPro?????????????????????????????????“????”?????????????????????????????????ζ??

  “SoluPro??????????????????????????????????????????”McClain???“???????????????????????????????????????????IgG1??IgG4?????”????????????????з??????л???????????????????CHO????????????????“AbSci????????Щ?????????????????????SoluPro???????Ч??????????????????????????????Fc???????Σ????????????????????????”?????

  Dyadic?????????????????????????????????????????C1???????????Dyadic??????з??????????????????????????????????????????????100?????ù???????????“C1”??????????????????????????????C1???????????????????????????????????á????????????????????????????????????????????????C1??????????2С?????CHO?????????20С??????????????????????????????????????????????????CHO???????????????衣

  ??Dyadic?????й?Mark Emalfarb??????CHO????????????????????????Ч?????Emalfarb???“???????????????????????????2??5????????????????????CHO????????????С??????????????CHO???????????????”???C1??????????????????У????????ε??????????????????????????????磬?????????????????????????????????????????????????

  Dyadic?????C1?????Ч???????????????塢?????????????塢fc-???????fab??????????Σ?????????????????硣Emalfarb???“?????????????VLPs???????????????????????????????????Ч?????磬?????????????????????????????????????VLP???????????δ?????????????????”

  Dyadic??????????????C1????????в????????????????????????????????????????????????????“??CHO????????C1??????????????”Dyadic????????Matthew Jones???????“C1????????????????????????????????????????????Щ???????????á?”????????????????????????-???????????????????????о????C1????????????????????????????????????????????????????

  ???????????????????????Щ????????粻???CHO????а?????????????衣?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????McClain??Emalfarb?????????????????????????????????????棬??????????????????????????????Ч??????????????????硣

  ?????в??????????????????????ж???????????????????????????и????????????????????????????????????CRISPR/Cas9??????????????????????????????????????????????????????????Щ????????????????????洦??????????????????????????????????????????????

 

????????????й?????????????????о??????о??????

?ο?????

1.B. Enghiad, H. Zhao, ACS Synth. Biol. 6, 752-757 (2017).

2.A. Lapinaite, J. A. Doudna, J. H. D. Cate, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 115, 3368-3373 (2018). 

3.T. Suzuki et al., Sci. Rep. 8, 10051 (2018).

4.Y. Okamoto et al., Nature Comm. 9, 1943 (2018).

| ??? | ???? |